mitosis en células de raíz de cebolla

Mitosis en células de raíz de cebolla

Materiales:

-portaobjetos. –mechero de alcohol.

-cubreobjetos. –tijeras.

-cubeta de tinción. –papel de filtro.

-aguja enmangada. –vaso de precipitados.

-pinzas y palillos. –vidrio de reloj.

-frasco lavador. Orceína A y B.

Procedimiento:

1. Llenar un vaso de precipitados con agua y colocar un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. Al cabo de 3-4 días aparecerán numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
2. Cortar con las tijeras unos 2-3mm. del extremos de las raicillas y depositarlo en un vidrio de reloj en el que se han vertido 2-3ml de orceína A.
3. Calentar suavemente el vidrio de reloj a la llama del mechero durante unos 8 minutos, evitando la ebullición, hasta la emisión de vapores tenues.
4. Con las pinzas tomar uno de los ápices o extremos de las raicillas y colocarla sobre un portaobjetos, añadir una gota de orceína B y dejar actuar durante 1 minuto.
5. Colocar el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con el mango de una aguja enmangada dar unos golpecitos sobre el cubre sin romperlo de modo que la raíz quede extendida.
6. Sobre la preparación colocar unas tiras de papel de filtro, 5 o 6. Poner el dedo pulgar sobre el papel de filtro en la zona del cubreobjetos y hacer una suave presión, evitando que el cubre resbale. Si la preparación está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se realice.
7. Observar al microscopio. La orceína A reblandece las membranas celulares y la B completa el proceso de tinción. Con la presión sobre el porta de la preparación se logra una extensión y difusión de las células del meristemo de la cebolla.

Preparación de la Orceína A y B.

1. orceína A: tinción de cromosomas.

-orceína…………………………………….2 gramos.

-ácido acético………………………………45,8 ml.

-ácido clorhídrico 1mol/L………………….8,3ml.

-agua………………………………………..45,8ml.

2. orceína B: tinción de cromosomas.

-orceína………………………………………2 gramos.

-ácido acético………………………………..55ml.

-agua…………………………………………55ml.